發(fā)布時(shí)間: 2024-11-27 點(diǎn)擊次數(shù): 89次
在環(huán)境科學(xué)與工業(yè)衛(wèi)生領(lǐng)域,多環(huán)芳烴(PACs)作為一類(lèi)廣泛存在的污染物,其含量和毒性評(píng)估一直是研究的重點(diǎn)。Moltox硝化試驗(yàn)作為一種高效、靈敏的分析方法,為量化復(fù)雜混合物、燃燒產(chǎn)物及相關(guān)環(huán)境樣品中的PACs提供了強(qiáng)有力的支持。
Moltox硝化試驗(yàn)的核心在于利用化學(xué)硝化反應(yīng)將PACs轉(zhuǎn)化為硝基衍生物,進(jìn)而通過(guò)特定的生物測(cè)試方法——Ames試驗(yàn),來(lái)評(píng)估這些硝基衍生物的致突變性。這一轉(zhuǎn)化過(guò)程不僅提高了PACs的檢測(cè)靈敏度,還賦予了該方法近乎絕對(duì)的化學(xué)選擇性,確保只有PACs被衍生化并用于后續(xù)的毒性評(píng)估。
試驗(yàn)過(guò)程中,首先需要對(duì)樣品進(jìn)行化學(xué)硝酸處理,通常在80℃下與濃硝酸反應(yīng)30分鐘。這一步驟確保了即使對(duì)于耐衍生化的化合物也能發(fā)生反應(yīng),從而提高了方法的整體靈敏度。隨后,硝化反應(yīng)完成后的樣品會(huì)被冷卻至室溫,并用二氯甲烷進(jìn)行萃取。萃取后的殘留物會(huì)被重組為二甲基亞砜(DMSO),用于后續(xù)的Ames測(cè)試。
Ames試驗(yàn),特別是非活化試驗(yàn)版本,是Moltox硝化試驗(yàn)的重要組成部分。該版本的Ames試驗(yàn)使用了具有內(nèi)源性硝基還原酶的TA98菌株,這使得硝基PACs能夠在細(xì)菌內(nèi)部被活化為致突變形式,而無(wú)需添加外源代謝混合物(S-9)。這一特性不僅提高了試驗(yàn)的靈敏度,還使得DNA加合物物種在細(xì)菌內(nèi)部產(chǎn)生,避免了通過(guò)細(xì)胞壁運(yùn)輸?shù)膹?fù)雜過(guò)程。
Moltox硝化試驗(yàn)的終點(diǎn)是硝化致突變性指數(shù)(NMI),它反映了樣品中硝基PACs的致突變效力。雖然NMI不能直接預(yù)測(cè)致癌潛力,但它可以作為比較各種復(fù)雜混合物相對(duì)PACs含量的一種有效手段。此外,由于改良Ames試驗(yàn)和硝化試驗(yàn)中測(cè)得的致突變性與PACs濃度成正比,因此可以在具有相似組成特征的樣品之間建立相關(guān)曲線,進(jìn)一步拓展了該方法的應(yīng)用范圍。
綜上所述,Moltox硝化試驗(yàn)以其高靈敏度、高選擇性和簡(jiǎn)便的操作流程,在環(huán)境污染物檢測(cè)、工業(yè)衛(wèi)生監(jiān)測(cè)以及生物監(jiān)測(cè)研究中發(fā)揮著重要作用。