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北京華新康信生物科技有限公司專注于生命科學領域,由豐富從業經驗的技術團隊和管理團隊組建而成,主營生物化學試劑,儀器,實驗耗材等。
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細胞增殖的檢測對于評估細胞健康,確定遺傳毒性或評估抗癌藥物關重要。這通常是通過在復制過程中向細胞中加入[3H]胸苷或5-溴-2'-脫氧尿苷(BrdU)等核苷類似物來進行的,并通過放射自顯影或分別使用抗BrdU抗體檢測或觀察它們摻入DNA中的情況。 。兩種方法都有一些局限性。由于[3H]胸苷的放射性,因此很麻煩。放射自顯影很慢,因此不適合快速的高通量研究。BrdU染色的主要缺點是雙鏈DNA阻止了抗BrdU抗體進入BrdU單元。
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baseclick EdU-Click測定法克服了這些限制,為BrdU和[3H]胸苷測定細胞增殖提供了更好的替代方法。EdU(5-乙炔基-2'-脫氧尿苷)是胸苷的核苷類似物,在活性DNA合成過程中被摻入DNA中。與BrdU分析相比,EdU-Click分析不是基于抗體的,因此不需要DNA變性即可檢測摻入的核苷。
PCR片段的標記:
Baseclick的PCR-Click標記試劑盒包含通過基于點擊化學的便捷操作兩步法生成高度標記的PCR產物所需的所有試劑。在三磷酸鹽混合物中,dTTP替換為C8-炔烴-dUTP或dCTP替換為C8-炔烴-dCTP。兩種混合物均可與優化的Baseclick聚合酶一起用于標準PCR反應。所得的PCR產物包含炔部分,其在良性點擊反應條件下以高度選擇性的方式與熒光染料,半抗原等的疊氮基衍生物反應??梢酝ㄟ^點擊反應中使用的疊氮化物標記物的量來調節標記物的摻入??梢赃_到高達20%或更高的標簽率!
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