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北京華新康信生物科技有限公司代理Biosearch品牌。北京華新康信生物科技有限公司是Biosearch品牌代理商。Biosearch一級代理
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Biosearch代理 北京華新康信生物科技有限公司 Biosearch一級代理
Biosearch品牌提供一系列免疫化學試劑,其中包括半抗原報告基團和蛋白質,FICOLL和熒光團偶聯物。
Biosearch品牌半抗原結合物
我們的結合物系列包括經過充分研究的小分子半抗原,例如DNP,TNP,NP,NIP和PC(磷酸膽堿)。根據研究人員所需的抗體反應,可以使用各種水平的綴合密度。這樣的試劑是*抗原,可用于在動物模型中誘導抗體應答。
NP-KLH(匙孔血藍蛋白)
使用NP的消光系數= 4.23 x 10E + 03,通過在430nm下測量NP吸光度來確定pH值為8.5時的結合。假設KLH的分子量為100,000,則共軛比以NP與KLH的摩爾比給出。將溶液分裝在+ 5°C下。如果冷凍,KLH將從溶液中分離出來。避光。該產品可以1mg / mL的濃度溶于PBS緩沖液,水或其他中性緩沖液中。產品溶解或儲存在溶液中可能會沉淀,因此,建議在使用前將溶液超聲處理30分鐘。使用PBS時,請參考以下配方。PBS配方:8克氯化鈉0.2克氯hua鉀0.2克磷酸二氫鉀(KH2PO4)1.15克磷酸氫二鈉(Na2HPO4)加到1升水中
LGC Biosearch Technologies不提供定制的免疫化學產品。對于任何給定的免疫化學試劑,其結合率將隨每次生產而變化。我們沒有辦法預測下一次生產的比例。我們預計,摩爾比的微小變化(如每個蛋白質12個半抗原)不會改變性能。可用的共軛比率可以在免疫化學產品類別內每個特定產品網頁底部的“數量”框右側的“負載”下拉菜單下找到。
共軛比是半抗原與蛋白質的摩爾比。我們建議使用比爾定律來計算共軛比:
A =ε* L * C
以下是NP-BSA(與牛血清白蛋白共軛的4-羥基-3-硝基苯基乙酰基半抗原)的共軛比計算示例。
已知值
甲NP(半抗原(NP)在430納米,pH 8.5的測定吸光度):對于這個例子,我們將使用OD430 = 1
ε NP(在430nm處的半抗原(NP)的消光系數):4230中號-1 cm -1
L(路徑長度):通常將此值假定為1 cm
計算Ç NP(半抗原(NP)的摩爾濃度)
C ^ NP = A NP /(ε NP * L)
C ^ NP = OD430(無單位)/(ε NP(M -1厘米-1)* 1厘米)
Ç NP = 1/4230 M -1
C NP = 0.000236摩爾或236 uM
計算C BSA(BSA的摩爾濃度)
如果提供了質量濃度,請確保通過將質量濃度除以分子量來轉換為摩爾濃度。例如,如果將NP-BSA溶解在0.1 M NaHCO 3(pH 8.5)中1 mg / mL(根據產品頁面“技術規格”標簽下的使用說明,建議使用),則BSA的質量濃度為1毫克/毫升或1克/升。
知道BSA的大約分子量(MW)為60,000 g / mol,則BSA的摩爾濃度為:
C BSA =質量濃度/ MW
C BSA =(1 g /升)/(60,000 g /摩爾)
C BSA = 0.0000167摩爾/升或16.7 uM
計算共軛比(半抗原(NP)與(BSA)的摩爾比(n))
n = C NP / C BSA
n = 236 uM / 16.7 uM
n≈與每個BSA分子(NP14-BSA)綴合的NP半抗原
半抗原與蛋白質的高可用綴合比(即NP / BSA)在ELISA分析中應用于捕獲半抗原特異性抗體
關于免疫化學試劑,單詞“負荷”是指綴合比,其是綴合單個蛋白質的半抗原基團的平均數。通常認為,用較低密度的半抗原載體進行免疫,再加上低免疫原劑量,將優先在較低的免疫應答中觸發高親和力抗體。相反,用高密度半抗原載體結合高免疫原劑量進行免疫可能會引發更高的免疫反應,因為還會觸發低親和力抗體。
我們的免疫化學產品沒有沉淀出明礬,我們不提供此服務。您可以在以下參考資料中找到明礬沉淀的協議:細菌LPS和/或明礬沉淀響應多糖和蛋白質抗原的佐劑作用。
北京華新康信生物科技有限公司是Biosearch品牌代理商。