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產(chǎn)品展示PRODUCTS
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pNZ2122乳酸乳球菌 矢量,mcs XH,食品級(jí)
交貨時(shí)間約 8 – 10天
訂單號(hào): VS-ELV01300
單位尺寸: 10微克
供應(yīng)商: MoBiTec GmbH
運(yùn)輸: 逆轉(zhuǎn)錄
存儲(chǔ): 4°攝氏度
產(chǎn)品子類別: 乳球菌表達(dá)系統(tǒng)
圖片: pNZ2122.png
1引言
乳酸乳球菌和其他乳酸的組成型基因表達(dá)系統(tǒng)由荷蘭NIZO食品研究公司開(kāi)發(fā)的細(xì)菌易于操作且易于操作對(duì)于以下應(yīng)用程序具有優(yōu)勢(shì):
?過(guò)量表達(dá)同源和異源基因用于功能研究和
獲得大量的特定基因產(chǎn)物
?代謝工程
?適合蛋白質(zhì)分泌
1.1乳酸乳球菌 MOBITEC專業(yè)代理
乳酸乳球菌是同型發(fā)酵細(xì)菌。它的主要功能是快速乳酸由糖產(chǎn)生酸。廣泛具有的功能特征
乳球菌研究包括碳代謝,細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)蛋白水解系統(tǒng),抗生素物質(zhì)的產(chǎn)生及其與和抵抗噬菌體。許多乳酸乳球菌菌株的基因組信息是公開(kāi)的可用。豐富的知識(shí)和經(jīng)驗(yàn)導(dǎo)致了乳球菌的使用。
生物技術(shù)的幾個(gè)領(lǐng)域,例如細(xì)菌和病毒抗原的表達(dá)通過(guò)粘膜免疫接種,人細(xì)胞因子產(chǎn)生及其他安全接種原位治療的治療劑,乳球菌作為細(xì)胞工廠的用途特定化合物的生產(chǎn)以及藥品的中試生產(chǎn)(Mierau,2005年)。
1.2乳酸乳球菌質(zhì)粒在其他革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌中的用途 MOBITEC專業(yè)代理
具有復(fù)制源于乳酸乳球菌的質(zhì)粒可用于所有乳酸菌和在其他革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌中,例如枯草芽孢桿菌(Silke David,1989,AEM55:1483;克里斯·普拉特(Chris Platteeuw),1994,AEM 60:587。伊麗莎白·索維格(Elisabeth Sorvig),2005年,微生物學(xué),151:2439; Indranil Biswas,2008,微生物學(xué),154:2275)。
1.3密碼子用法
直到近,密碼子的使用還是一個(gè)重要的問(wèn)題,在乳酸乳球菌中表達(dá)異源基因(DNA的GC含量為35-37%)。當(dāng)一個(gè)基因供體生物與乳酸乳球菌密切相關(guān),或者DNA GC含量與
與乳酸乳球菌相比,基因成功表達(dá)的可能性很高。如今,廉價(jià),可靠的量身定制的DNA合成技術(shù)已經(jīng)面世,對(duì)特定靶基因起源的限制,如已知氨基酸序列,可以設(shè)計(jì)與宿主密碼子使用模式匹配的基因生物。除了一般的密碼子優(yōu)化外,還可以使用特定的密碼表,例如高度表達(dá)的核糖體蛋白基因的密碼子表,以進(jìn)一步增加產(chǎn)品形成。
2個(gè)產(chǎn)品
2.1宿主菌株
乳酸乳球菌亞種。 creemoris MG1363乳品菌株NCDO712的無(wú)質(zhì)粒子代。廣泛使用的宿主菌株乳酸乳球菌的克隆和基因表達(dá)(Gasson,1983)。
乳酸乳球菌NZ3000
食品級(jí)選擇的標(biāo)準(zhǔn)品系基于乳糖生長(zhǎng)的能力。的通常存在于質(zhì)粒中的乳糖操縱子已整合到
染色體和lacF基因被刪除。 lacF基因的缺失使該菌株除非在質(zhì)粒上提供lacF,否則無(wú)法在乳糖上生長(zhǎng)(van Alen-Boerrigter andde Vos,未發(fā)布的數(shù)據(jù); de Ruyter et al。,1996)。
乳酸乳球菌NZ1330
該宿主菌株是根據(jù)alr選擇用于食品級(jí)表達(dá)系統(tǒng)的標(biāo)記。它是通過(guò)刪除alr基因(一種丙氨酸消旋酶編碼基因)而產(chǎn)生的,在祖先菌株MG1363中。 alr基因的缺失導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)缺陷
必需成分D-丙氨酸,表明該菌株無(wú)法在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)除非在質(zhì)粒上提供了alr,否則無(wú)需D-丙氨酸即可將L-丙氨酸轉(zhuǎn)化為D-丙氨酸。 alr基因可作為食品級(jí)補(bǔ)充標(biāo)記(Bron等,2002)。
2.2質(zhì)粒
所有質(zhì)粒均基于pSH71滾環(huán)復(fù)制子(de Vos,1987)。MOBITEC
pNZ124:具有乳酸乳球菌多個(gè)克隆位點(diǎn)的通用廣譜宿主克隆載體和其他乳酸菌;氯霉素選擇; (Platteeuw等,1994)MOBITEC
pNZ2103:在宿主的控制下用于組成型基因表達(dá)的廣泛宿主載體lacA啟動(dòng)子;用于轉(zhuǎn)錄融合;氯霉素選擇; (Platteeuw等,1996)MOBITEC
pNZ2105:具有多個(gè)乳桿菌克隆位點(diǎn)的通用食品級(jí)克隆載體 MOBITEC
NZ3000;基于LacF的選擇; (Platteeuw等,1996)MOBITEC
pNZ2122:在lacA控制下用于組成型基因表達(dá)的食品級(jí)載體乳酸乳球菌NZ3000的啟動(dòng)子;用于轉(zhuǎn)錄融合;基于LacF的選擇;(Platteeuw等,1996) MOBITEC
pNZ2123:食品級(jí)載體;與pNZ2122相同,但具有多個(gè)克隆位點(diǎn) 基于LacF的選擇; (Platteeuw等,1996) MOBITEC
pNZ2125:具有適用于基因的多個(gè)克隆位點(diǎn)的食品級(jí)克隆載體 表達(dá)到乳酸乳球菌菌株NZ1330中;基于alr的選擇; (Platteeuw等,1996) MOBITEC
pNZ7021:在宿主的控制下用于組成型基因表達(dá)的廣泛宿主載體 強(qiáng)啟動(dòng)子PpepN;氯霉素選擇; (Wegkamp et al。,2007)該載體設(shè)計(jì)用于翻譯融合。它包含pepN核糖體結(jié)合
位點(diǎn)(RBS)和起始密碼子(ATG),然后是SphI位點(diǎn),這對(duì)于沒(méi)有自身核糖體結(jié)合位點(diǎn)的靶基因的克隆和起始密碼子。MOBITEC
pNZ7025:在pepN控制下用于組成型基因表達(dá)的食品級(jí)載體發(fā)起人基于alr的選擇; (Wegkamp et al。,2007)該載體還被設(shè)計(jì)用于如上所述的質(zhì)粒的翻譯融合。MOBITEC
pNZ7021 注意:重要的是要考慮為轉(zhuǎn)錄融合只能用于使用任何可能的克隆位點(diǎn)克隆具有自身核糖體結(jié)合位點(diǎn)和自身起始密碼子的靶基因。但是,那設(shè)計(jì)用于翻譯融合的表達(dá)載體同時(shí)提供啟動(dòng)子和翻譯 起始區(qū)域,包括RBS和起始密碼子的序列,后跟一個(gè)重要的克隆位點(diǎn)。在這種情況下,必須使用相應(yīng)的限定的限制性位點(diǎn),導(dǎo)致開(kāi)放框在框內(nèi)插入閱讀框(ORF)。
所有質(zhì)粒均從水中凍干。使用TE緩沖液或水重新配制質(zhì)粒DNA。MOBITEC
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